將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養(yǎng)基中培養(yǎng),使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養(yǎng)。
蛋白酶抑制劑與蛋白酶一樣,都是紛繁復雜的,通常使用許多化學物質作為蛋白酶抑制劑,如 PMSF 和 leupeptin 。而且由于一種蛋白酶抑制劑只對某一類蛋白酶起作用,因此通常建議復合使用蛋白酶抑制劑
細胞免疫熒光(Immunofluorescence, IF)是一種常用的技術,用于檢測細胞內特定蛋白質或其他分子的分布和表達情況。分析細胞免疫熒光的結果涉及多個步驟,包括圖像采集、圖像處理、定量分析和數據解釋。
真核生物的一切有核細胞(包括培養(yǎng)細胞)都能用來制備基因組 DNA。真核生物的DNA是以染色體的形式存在于細胞核內,因此,制備DNA的原則是既要將DNA與蛋白質、脂類和糖類等分離,又要保持DNA分子的完整。提取DNA的一般過程是將分散好的組織細胞在含SDS(十二烷基硫酸鈉)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白質,再用酚和氯仿/異戊醇抽提分離蛋白質,得到的DNA溶液經乙醇沉淀使DNA從溶液中析出。
菌種保藏的方法很多,但原理大同小異。首先要挑選優(yōu)良純種。利用微生物的孢子、芽孢及營養(yǎng)體;其次,根據其生理、生化性,人為創(chuàng)造低溫、干燥或缺氧等條件,抑制微生物的代謝作用,使其生命活動降低到極低的程度或處于休眠狀態(tài),從而延長菌種生命以及使菌種保持原有的形狀,防止變異。不管采用哪種保藏方法,在菌種保存過程中要求不死亡、不污染雜菌和不退化。