發(fā)酵染菌：指在發(fā)酵過程中生產(chǎn)菌以外的其他微生物侵入了發(fā)酵系統(tǒng)，從而使發(fā)酵過程失去真正意義上的純種培養(yǎng)。
標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)定如無特殊規(guī)定，應(yīng)嚴(yán)格按照USP25或CP2000規(guī)定的方法操作。
常細(xì)胞生長得非?？鞎r，pH值通常下降得很快。此時可以及時傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外，培養(yǎng)瓶蓋擰得太緊、NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細(xì)菌、酵母或真菌污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快。
通常細(xì)胞體外培養(yǎng)時需要加入血清，以維持細(xì)胞的生長和存活。而除了血清之外，部分細(xì)胞在培養(yǎng)過程中需要添加胰島素和β-巰基乙醇等成分來維持細(xì)胞狀態(tài)。MCF-7和NIH:OVCAR-3等細(xì)胞需要額外添加胰島素，而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等細(xì)胞則需要添加β-巰基乙醇，不同細(xì)胞加入量會有差異，需根據(jù)細(xì)胞類型判斷。
常規(guī)的PCR需要專門制備DNA模板,面菌落PCR可直接以單個菌落作為模板,用無菌牙挑取單個菌落到TE級沖液中,煮沸10mn,渦旋振蕩后短暫離心,用1-2pl裂解液作為DNA模板,省去抽提模板DNA這一步,通過特異性引物或通用引物對目的基因進(jìn)行快速擴(kuò)增大大節(jié)約了時間和成本
操作中必須有“無菌操作”的概念，所用玻璃器皿必須是完全滅菌的，不得殘留有細(xì)菌或抑菌物質(zhì)。所用剪刀、鑷子等器具也必須進(jìn)行消毒處理。樣品如果有包裝，應(yīng)用75%乙醇在包裝開口處擦拭后取樣。操作應(yīng)當(dāng)在超凈工作臺或經(jīng)過消毒處理的無菌室進(jìn)行。瓊脂平板在工作臺暴露15分鐘，每個平板不得超過15個菌落。
菌種在分離、保藏和生產(chǎn)過程中，極易遭致雜菌污染，因此必須對染有雜菌的菌種進(jìn)行提純，方能用于生產(chǎn)。根據(jù)污染的類型和程度，需采用不同的純化措施。
