Western Blot顯色的方法主要有以下幾種： i. 放射自顯影 ii. 底物化學(xué)發(fā)光ECL iii. 底物熒光ECF iv. 底物DAB呈色 現(xiàn)常用的有底物化學(xué)發(fā)光ECL和底物DAB呈色，體同水平和實(shí)驗(yàn)條件的是用第一種方法，目前發(fā)表文章通常是用底物化學(xué)發(fā)光ECL。只要買現(xiàn)成的試劑盒就行，操作也比較簡(jiǎn)單，原理如下（二抗用HRP標(biāo)記）：反應(yīng)底物為過(guò)氧化物+魯米諾，如遇到HRP，即發(fā)光，可使膠片曝光，就可洗出條帶。
支持物是人工合成的交聯(lián)高聚物，在水中膨脹后成為凝膠。凝膠內(nèi)為內(nèi)水層，凝膠周圍的水為外水層。控制交聯(lián)度以形成不同孔徑的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。交聯(lián)度小的孔徑大，交聯(lián)度大的孔徑小。
操作應(yīng)當(dāng)在超凈工作臺(tái)或經(jīng)過(guò)消毒處理的無(wú)菌室進(jìn)行。瓊脂平板在工作臺(tái)暴露15分鐘，每個(gè)平板不得超過(guò)15個(gè)菌落。
細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)，如鞭毛、莢膜、細(xì)胞壁、芽孢及異染顆粒等，用普通染色法不易著色，故需用特殊染色法。
硝酸銀是一種腐蝕性強(qiáng)的化學(xué)試劑，在操作過(guò)程中應(yīng)戴上防護(hù)手套和護(hù)目鏡等防護(hù)裝備，以避免對(duì)人體造成傷害。
在部分實(shí)驗(yàn)室，由于血清和培養(yǎng)條件等差異，轉(zhuǎn)染后鏡下培養(yǎng)基中可能出現(xiàn)少量黑點(diǎn)狀沉淀，為轉(zhuǎn)染試劑和血清中蛋白結(jié)合產(chǎn)物，不影響轉(zhuǎn)染結(jié)果和細(xì)胞狀態(tài)，可通過(guò)換液除去。
定義：在一個(gè)凝膠電泳系統(tǒng)中不同部位的pH、離子強(qiáng)度、緩沖液成分或凝膠孔隙大小不同的凝膠電泳。其目的在于提高電泳分離的范圍和分辨率。
無(wú)血清培養(yǎng)基，顧名思義，就是在細(xì)胞培養(yǎng)中不需要添加血清，但是在某些應(yīng)用中可能要添加生長(zhǎng)因子或細(xì)胞因子。無(wú)血清培養(yǎng)基中添加了血清的主要成分：粘附因子、生長(zhǎng)因子、必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和激素等，能減少血清帶來(lái)的不利因素，使細(xì)胞培養(yǎng)的條件更穩(wěn)定。經(jīng)歷了天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基后，無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。采用無(wú)血清培養(yǎng)可簡(jiǎn)化純化和鑒定各種細(xì)胞產(chǎn)物的程序，避免病毒污染造成的危害。
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