由于EDTA是白色結(jié)晶粉末,本身不易得到純品,所以只能用間接標(biāo)定的方法來配制.以鉻黑T為指示劑,用金屬離子與EDTA作用,從而確定其準(zhǔn)確濃度。
在生物化學(xué)研究領(lǐng)域,蛋白質(zhì)的分離提取技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用,想要把蛋白質(zhì)提取出來非常不容易,需要經(jīng)過很多工序,并且要找到專業(yè)的操作技術(shù),現(xiàn)在有下列這些方法可以提取蛋白質(zhì)。
無(wú)論是保存還是運(yùn)輸,請(qǐng)避免反復(fù)凍融。反復(fù)凍融,冰晶會(huì)破壞抗體和重組蛋白的空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致蛋白變性形成多聚體和重組蛋白構(gòu)象改變,從而降低抗體的結(jié)合能力,也加快了抗體球蛋白和重組蛋白的降解速度??贵w和重組蛋白保存得當(dāng)與否,直接決定了抗體和重組蛋白的活性使用效果,如果保存得當(dāng),抗體和重組蛋白活性大部分都可以維持?jǐn)?shù)年。
我們進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室要穿好工作服,不要存僥幸心里,如果一不小心碰到酸,心愛的衣服燒個(gè)洞是小事,燒傷皮膚就麻煩了。不要嫌麻煩,一定要戴手套才做對(duì)身體有危害的實(shí)驗(yàn),要對(duì)自己的身體負(fù)責(zé)。
紫外線消毒:在室溫20℃~25℃時(shí),220V 30W紫外燈下方垂直位置1.0m處的253.7mm紫外線輻射強(qiáng)度應(yīng)≥70uW/cm2,低于此值時(shí)應(yīng)更換。適當(dāng)數(shù)量的紫外燈,確保平均每立方米應(yīng)不少于1.5W。
質(zhì)粒具有穩(wěn)定可靠和操作簡(jiǎn)便的優(yōu)點(diǎn)。如果要克隆較小的DNA 片段( <10kb) 且結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,質(zhì)粒要比其它任何載體都要好。在質(zhì)粒載體上進(jìn)行克隆,從原理上說是很簡(jiǎn)單的,先用限制性內(nèi)切酶切割質(zhì)粒DNA 和目的DNA 片段,然后體外使兩者相連接,再用所得到重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化細(xì)菌,即可完成。但在實(shí)際工作中,如何區(qū)分插入有外源DNA 的重組質(zhì)粒和無(wú)插入而自身環(huán)化的載體分子是較為困難的。
輔酶盡管不同于酶的底物,但在作用方式上和底物類似,在酶反應(yīng)過程中與酶結(jié)合、分離及反復(fù)循環(huán)。輔酶用量的確定可將它們按底物處理。例如乳酸脫氫酶中輔酶按雙底物動(dòng)力學(xué)方程計(jì)算。
血清并不是生來就為養(yǎng)細(xì)胞而來的。血清是全血的一部分,組分很復(fù)雜,有 150 多種已知組分組分,多種未知組分。這些組分中,有些對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)是有利的,有些對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)是無(wú)作用的,有些對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)反而是有害的。
微生物的培養(yǎng)基通常指人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖,或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。廣義上說,凡是支持微生物生長(zhǎng)繁殖的介質(zhì)或材料,均可作為微生物的培養(yǎng)基。一個(gè)適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基配方,對(duì)發(fā)酵產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量有著極大的影響。