B淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下,能夠分化、增殖形成具有針對這種抗原分泌特異性抗體的能力、B細(xì)胞的這種能力和量是有限的,不可能持續(xù)分化增殖下去,因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的、將這種B細(xì)胞與非分泌型的骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞,再進(jìn)一步克隆化,這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞是既具有瘤的無限生長的能力,又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞的能力,將這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或注入小鼠體內(nèi)即可獲得大量的高效價(jià)、單一的特異性抗體.這種技術(shù)即稱為單克隆抗體技術(shù)。
微生物定性檢驗(yàn)的專屬性是指檢測樣品中可能存在的特定微生物種類的能力。當(dāng)替代方法以微生物生長作為判斷微生物是否存在時(shí),其專屬性驗(yàn)證時(shí)應(yīng)確認(rèn)所用培養(yǎng)基的促生長試驗(yàn),還應(yīng)考慮樣品的存在對檢驗(yàn)結(jié)果的影響。當(dāng)替代方法不是以微生物生長作為判斷指標(biāo)時(shí),其專屬性驗(yàn)證應(yīng)確認(rèn)檢測系統(tǒng)中的外來成分不得干擾試驗(yàn)而影響結(jié)果,如確認(rèn)樣品的存在不會對檢驗(yàn)結(jié)果造成影響。采用替代方法進(jìn)行控制菌的檢驗(yàn),還應(yīng)選擇與控制菌具有類似特性的菌株作為驗(yàn)證對象。
鈉離子不參與細(xì)胞的組成,但仍是微生物發(fā)酵培養(yǎng)基的必要成分,鈉離子與維持細(xì)胞滲透壓有關(guān),故在培養(yǎng)基中常加入少量的鈉鹽,但用量不能過高,否則會影響微生物的生長。
明膠是一種非常重要的天然生物高分子材料,是由動物的皮骨及結(jié)締組織中的膠原部分降解成的。在食品、化妝品和制藥工業(yè)被廣泛使用。明膠一加熱即成為液體,遇冷則變成彈性固體凝膠塊。膠體的溶液-凝膠互相轉(zhuǎn)換是明膠特有的現(xiàn)象。因此,形成凝膠的能力是明膠一項(xiàng)很重要的性能。很早就有人試圖通過測算,用數(shù)字表示凝膠強(qiáng)度。
葉綠體色素是植物吸收太陽光能進(jìn)行光合作用的重要物質(zhì),主要由葉綠素a、葉綠素b、胡蘿卜素和葉黃素組成。從植物葉片中提取和分離色素是對其認(rèn)識和了解的前提。利用葉綠體色素能溶于有機(jī)溶劑的特性,可用丙酮提取。分離色素的方法有多種,紙層析是其中最簡便的一種。當(dāng)溶劑不斷地從層析濾紙上流過時(shí),由于混合物中各成分在兩相(即流動相和固定相)間具有不同的分配系數(shù),它們的移動速度不同,使樣品中的混合物得到分離。
凡鹽析所獲得的粗制蛋白質(zhì)(鹽析得到的IgG)中均含有硫酸銨等鹽類,這類將影響以后的純化,所以純化前均應(yīng)除去,此過程稱為“脫鹽”(desalthing)。脫鹽常用透析法和凝膠過濾法,這兩種方法各有利弊。前者的優(yōu)點(diǎn)是透析后析品終體積較小,但所需時(shí)間較長,且鹽不易除盡;凝膠過濾法則能將鹽除盡,所需時(shí)間也短,但其凝膠過濾后樣品體積較大。所以,要根據(jù)具體情況選擇使用。前實(shí)驗(yàn)中樣品體積較小,凝膠達(dá)濾后樣品體積不會太增加,所以選用凝膠過濾法。
.血液保存液常用種類 配方可分為:ACD(A,枸櫞酸;C,枸櫞酸三鈉;D,葡萄糖)與CPD(C,枸櫞酸三鈉;P,磷酸鹽;D,葡萄糖及枸櫞酸)兩大類保存液。在CPD中加腺嘌呤即為CPDA-1。
對于有殘留限量的藥物,添加濃度為MRL及MRL上下各一個(gè)濃度;對于禁用藥物,添加濃度為定量限和2倍定量限,每個(gè)添加濃度至少測定5個(gè)平行樣,并至少進(jìn)行3批實(shí)驗(yàn)(不同檢測日期,不同標(biāo)準(zhǔn)曲線,不同批次試劑盒)。
引物的設(shè)計(jì)和選擇符合熒光PCR的探針并進(jìn)行設(shè)計(jì)對于實(shí)時(shí)熒光PCR尤其重要??梢哉f,不合理的設(shè)計(jì)意味著絕對的失敗。但是,好的設(shè)計(jì)并不等于好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,影響PCR和熒光PCR的因素非常多,下面擇其重要進(jìn)行介紹。
質(zhì)粒干粉是指利用細(xì)菌體內(nèi)大量生產(chǎn)的質(zhì)粒進(jìn)行篩選、培養(yǎng)、破碎和干燥后得到的干燥粉末狀物,常用于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)存儲和運(yùn)輸質(zhì)粒DNA。